Wbudowany jądrowy korektor rdzeniowy 1 reguluje wchłanianie cholesterolu przez szlak kierowany TR (1 ad 6

Analizę statystyczną przeprowadzono przy użyciu jednoczynnikowej ANOVA, a następnie testu wielokrotnych porównań Tukeya. * P. 0,05; ** P. 0,01; *** P. 0,001. (C) Migawki przeglądarki genomu UCSC pokazujące dopasowanie histogramów dla pików ChIP TR uzyskanych w naszym laboratorium (TR3T3, TR3 PTU) i pików NCOP NCOP (NCoR) uzyskanych przez Feng i in. (42). Deiodinaza może mieć znaczący wpływ na sygnalizację TH w obrębie określonej tkanki. Jednoczesne rozbicie Lxra i Lxrb w połączeniu z dietą zachodnią powoduje dramatyczną indukcję wątrobowej ekspresji mRNA i aktywności enzymatycznej Dio2, która normalnie nie ulega ekspresji w wątrobie (40). Jednak ekspresja Dio2 we wszystkich genotypach myszy w naszym badaniu pozostawała niewykrywalna. Stwierdziliśmy również, że zgodnie z naszymi wcześniejszymi ustaleniami wątrobowa ekspresja NCoR. ID doprowadziła do podwyższenia poziomu Dio1 (20). Lxra. /. zwierzęta miały wyższą ekspresję Dio1 w porównaniu z kontrolami Lxra + / + i podczas gdy ekspresja Dio3 w wątrobie dorosłej myszy była bardzo niska, stwierdziliśmy, że była ona dalej obniżona w Lxra. /. zwierzęta (dodatkowa Figura 3A). Pomimo tego, ekspresja mRNA wątrobowych celów TH, takich jak Bcl3, Gpd2 i Idh3 (suplementowa figura 3B), nie była zmieniona u tych zwierząt, co sugeruje, że zmiany w poziomach ekspresji Dio1 i Dio3 w Lxra. /. myszy nie są fizjologicznie ważne dla sygnalizacji TH. Aby jeszcze bardziej ustalić rolę sygnalizowania TR w regulacji enzymów syntezy kwasów żółciowych, wykorzystaliśmy model opracowany niedawno i wykorzystywany do sekwencjonowania ChIP przez nasze laboratorium (41). W celu przezwyciężenia braku wiarygodnych przeciwciał anty-TR, użyto adenowirusa do nadekspresji ludzkiego TR (1 znakowanego motywem peptydu rozpoznającego ligazę biotyny (Blrp) w wątrobach myszy, które globalnie eksprymują ligazę biotinową BirA. Usieciowaną chromatynę uzyskaną z wątroby myszy z niedoczynnością tarczycy i nadczynnością tarczycy stosowano do strącania z użyciem kulek streptawidynowych, a następnie głębokiego sekwencjonowania. Zidentyfikowaliśmy 3 piany wiążące TR (1 w promotorze i pierwszy ekson z genu Cyp27a1, 2 piki w proksymalnym promotorze i 5. górny region w genie Cyp3a11 i 2 piki w obrębie promotora i intronu 12 genu Abcb11 (Figura 6C). Byliśmy w stanie potwierdzić wiązanie TR (1 w tych regionach, wykonując standardowe ChIP-qPCR za pomocą starterów zlokalizowanych we wskazanych regionach (Figura 6B i Tabela Uzupełniająca 2). Co ważne, lokalizacje tych pików są zgodne z lokalizacjami dla pików wiązania NCoR1 zidentyfikowanych przez Feng a i współautorów (odnośniki 42 i Figura 6C). Zatem, NCoR1 prawdopodobnie reguluje ekspresję tych genów syntezy i transportu kwasów żółciowych przez rekrutację przez TR. 1, a jego delecja zwiększy ich ekspresję. Dyskusja Rola sygnalizacji TH w regulacji poziomu cholesterolu w surowicy została dobrze rozpoznana od 1930 r. (43). Ponieważ wątroba odgrywa kluczową rolę w utrzymaniu homeostazy cholesterolu, poczyniono ostatnio postępy w opracowywaniu TR1-1 i specyficznych dla wątroby tyromimetali, które mogłyby potencjalnie być stosowane jako środki obniżające poziom cholesterolu bez niepożądanych skutków, które TH wywiera na serce i kość. Dokładne mechanizmy ich działania pozostają jednak niepełne (2-5, 9). Co ciekawe, wiele efektów aktywacji TR w wątrobie nakłada się z efektami agonistów LXR, co sugeruje, że mogą wystąpić potencjalne korzyści w aktywacji obu ścieżek (15, 17, 19, 25). Oprócz stosowania specyficznych ligandów, modulacja oddziaływań między NRs i ich kofaktorami stanowi kolejną możliwość aktywacji lub represji działań NR. Na przykład specyficzna dla wątroby aktywacja koaktywatora SRC-2 prowadzi do zwiększenia w komórkach FXR stymulacji wydzielania kwasów żółciowych, która ułatwia wchłanianie tłuszczu i reguluje pobór energii (44). Specyficzna dla mięśni i specyficzna dla adipocytów delecja NCoR1 prowadzi również do aktywacji pewnych szlaków NR w tych tkankach (45, 46). NCoR1 okazało się wiązać oba TR. i LXR. i represję transkrypcji ich docelowych genów w obecności ligandów (20, 47, 48). Rzeczywiście, myszy z ekspresją NCoR. ID specyficzną dla hepatocytów i całego ciała wykazują regulację w górę ekspresji wielu docelowych genów TR i LXR i wykazują zwiększoną wrażliwość na TH w wątrobie i innych tkankach (20, 21). W związku z tym wysunięto hipotezę, że zakłócenie interakcji między NCoR1 i NR w wątrobie poprawiłoby klirens cholesterolu poprzez aktywację szlaków regulowanych TR i / lub LXR i potencjalnie ujawniłoby nowe ścieżki, które mogłyby być celowane terapeutycznie. Jak tu pokazano, myszy L-a-ID wykazują polepszoną tolerancję na wysoki cholesterol w diecie, charakteryzujący się 2-krotnym obniżeniem stężenia cholesterolu w wątrobie w porównaniu ze zwierzętami kontrolnymi.
[hasła pokrewne: ursus koszalin, olej kokosowy organiczny, przetrząsarko zgrabiarka ]
[hasła pokrewne: przetrząsaczo zgrabiarka, przetrząsarko zgrabiarka, rozdrabniacz uniwersalny ]