Wbudowany jądrowy korektor rdzeniowy 1 reguluje wchłanianie cholesterolu przez szlak kierowany TR (1 ad 5

Nieoczekiwanie stwierdzono, że na poziom mRNA Cyp7a1 lub Cyp8b1 nie wpływa ekspresja NCoRy ID na Lxra + / + lub Lxra A /. tło (Figura 5A). Co ciekawe, ekspresja mRNA pierwszego enzymu w alternatywnym szlaku syntezy kwasu żółciowego, Cyp27a1, była znacząco podwyższona u myszy L-y ID niezależnych od LXR. (Figura 5B). Podczas gdy nie zaobserwowano zmian w ekspresji innego enzymu w alternatywnym szlaku, Cyp7b1, stwierdziliśmy, że Cyp3a11, główny enzym hydroksylacji kwasu żółciowego, który również został zaproponowany do udziału w alternatywnej syntezie kwasu żółciowego (33, 34), został znacznie zwiększony w górę w zwierzętach L-ID. (Figura 5A). Podczas gdy ekspresja Cyp3a11 była znacząco podwyższona w Lxra . /. zwierzęta, zwłaszcza na diecie 2% cholesterolu, wskazując, że LXR. a wewnątrzkomórkowe poziomy cholesterolu odgrywają rolę w jego regulacji, ekspresja NCoR . ID doprowadziła do dodatkowej regulacji w górę, co sugeruje, że zaangażowana jest również inna zależna od NCoR1 ścieżka (35). Stwierdziliśmy również, że poziomy ekspresji pompy eksportu soli żółci wątroby (BSEP, kodowane przez Abcb11) były podwyższone u myszy L-y ID, podczas gdy poziom mRNA dla Slc10a1 (kodujący białko NTCP), głównego transportera odpowiedzialnego za wychwyt kwasu żółciowego. do hepatocytów nie uległa zmianie (Figura 5A). Figura 5 Ekspresja wątrobowa enzymów metabolizmu kwasów żółciowych i transporterów u zwierząt L-yID. Poziomy ekspresji mRNA genów zaangażowanych w syntezę kwasów żółciowych, hydroksylację i transport oceniano ilościowo za pomocą QPCR (A) w wątrobach kontrolnych i zwierząt L-y ID na Lxra + / + i Lxra . /. tła karmione dietą z 2% cholesterolu przez 3 dni (n = 7. 9 zwierząt na grupę); (B) w wątrobach myszy karmionych karmą (n = 5. 9 zwierząt na grupę); (C) w pierwotnych hepatocytach izolowanych od zwierząt karmionych karmą ze wskazanymi genotypami. Pokazano wyniki eksperymentu (n = 3 dołki na genotyp). Analizę statystyczną przeprowadzono przy użyciu 2-drożnej ANOVA z post-testami Bonferroni (A i B) lub niesparowanym testem (C) ucznia, gdzie Lxra + / + i Lxra . /. hepatocyty izolowano w różne dni i nie próbowano porównywać tych 2 grup. * P. 0,05; ** P. 0,01; *** P. 0,001. Co ważne, ekspresja mRNA zarówno Cyp3a11, jak i Abcb11 była znacząco podwyższona u myszy L-y ID na Lxra + / + lub Lxra A /. tło karmione karmą dla dzieci (Figura 5B), jak również w izolowanych pierwotnych hepatocytach (Figura 5C), co sugeruje autonomiczny wobec komórek efekt NCoR1. Poziomy mRNA Cyp27a1 były również znacząco podwyższone u myszy karmionych Lxra + / + L-y ID karmionych karmą i pierwotnych hepatocytów (Figura 5, BCHC). Tak więc, zwiększenie aktywności Cyp3a11 i Cyp27a1 u myszy L-yID prawdopodobnie odpowiada za zmiany składu puli soli żółciowej i wskaźnika hydrofobowości, podczas gdy zwiększona ekspresja Abcb11 może mieć pozytywny wpływ na strumień i wydalanie kwasu żółciowego. Cyp27a1, Cyp3a11 i Abcb11 to TR. cele. Wcześniej wykazaliśmy, że NCoR . ID zwiększa sygnalizację LXR i TR w wątrobie. Ponieważ wpływ na metabolizm cholesterolu ma LXR. niezależne i wydaje się, że pośredniczy w regulacji genów Cyp27a1, Cyp3a11 i Abcb11, następnie zapytaliśmy, czy te geny są celami TH (rysunek 6). Rzeczywiście, Cyp27a1 reprezentuje klasyczny pozytywny cel TH, który jest obniżony u myszy z niedoczynnością tarczycy i jest znacząco stymulowany przez T3 (Figura 6A i pozycje odniesienia, 20, 36). Cyp3a11 jest również regulowany przez T3 (37), ale wykazuje nietypowy wzór z regulacją w dół w stanie niedoczynności tarczycy i dalszym tłumieniem za pomocą traktowania T3 (Figura 6A). Ekspresja Abcb11 nie była dotknięta niedoczynnością tarczycy, ale leczenie T3 prowadziło do jego regulacji w górę (Figura 6A). Ponieważ Cyp3a11 został opisany jako docelowy gen CAR (38), a Abcb11 jest znanym docelowym FXR (Nr1h4) (39), zbadaliśmy ekspresję tych NR w myszach L-y ID. MRNA (Nr1i3) samochodu został stłumiony u zwierząt L-y ID na wszystkich podłożach, podczas gdy ekspresja jego prototypowego celu Cyp2b10 nie uległa istotnej zmianie (Suplementowa Figura 2A). Ani Fxr (Nr1h4), ani docelowe poziomy mRNA Shp (Nr0b2) nie uległy zmianie w żadnym z badanych genotypów, co sugeruje, że te NR nie są odpowiedzialne za zwiększenie ekspresji Cyp3a11 i Abcb11 (Suplementowa Figura 2B). Ryc. 6Cyp27a1, Cyp3a11 i Abcb11 są celami TR. (A) Ekspresję wskazanych genów oznaczono ilościowo za pomocą QPCR na RNA wyizolowanym z wątroby myszy eutyreozy (chow), niedoczynności tarczycy (PTU) i myszy z nadczynnością tarczycy (PTU + T3). (n = 6. 7 zwierząt na grupę). (B) ChIP, a następnie QPCR dla wskazanych regionów genów Cyp27a1, Cyp3a11 i Abcb11, przeprowadzono stosując agarozę streptawidynową i chromatynę izolowaną z wątroby myszy z nadekspresją GFP (kontrolną) lub biotynylowaną TR3 (w której pośredniczy wątrobowy adenowirus). 5 reakcji wytrącania powinowactwa na grupę)
[przypisy: rehabilitacja po złamaniu szyjki kości udowej, ursus 11054, przetrząsaczo zgrabiarka ]
[więcej w: polskie towarzystwo medycyny estetycznej, ursus 11054, ursus 8014h ]