Sygnalizacja poprzez CD28 i CTLA-4 kontroluje dwie różne formy anergii komórek T ad 8

Dlatego dodanie anty-CTLA-4 podczas pierwotnej stymulacji nie przywróciło odpowiedzi tych komórek na ligację TCR / CD28. Jednak traktowanie anty-CTLA-4 podczas pierwotnej stymulacji było zdolne do przywrócenia reaktywności niepodzielonych komórek T CD4 + do IL-2, ponieważ frakcja komórek T CD4 +, które nie uległy podziałowi podczas blokady CTLA-4 wykazywała pięciokrotnie większą odpowiedź proliferacyjną. IL-2 niż niepodzielone limfocyty T CD4 + stymulowane w warunkach, które pozwoliły na interakcje CTLA-4B7 (rysunek 4g, rysunek 4h, porównanie zestawów kolumn dwa i cztery). Ponieważ oba fragmenty Fab anty-CTLA-4 (jak pokazano na Fig. 4, ag) i całe przeciwciało anty-CTLA-4 (Figura 4h) miały podobne działanie w tym modelu, wnioskujemy, że opisane powyżej efekty biologiczne wynikają z blokady transdukcji sygnału za pośrednictwem CTLA-4 ., a nie poprzez bezpośrednią sygnalizację przez receptor CTLA-4. Wyniki te sugerują, że sygnalizacja CTLA-4 reguluje indukcję anergii związanej z aresztowaniem związanym z dwoma poziomami: (a) przez zwiększenie prawdopodobieństwa, że pojedyncza komórka T CD4 + nie będzie się dzielić po stymulacji TCR / CD28, oraz (b) przez upośledzenie integralności przekazywania sygnału za pośrednictwem receptora IL-2 w niepodzielnej puli komórek T CD4 + podczas ponownej stymulacji tych komórek. Co ciekawe, limfocyty T CD4 +, które proliferowały w warunkach pierwotnej blokady CTLA-4 / B7, nie reagowały na restymulację TCR / CD28 (Figura 4d, Figura 4h, trzeci zestaw kolumn) i zamiast tego wykazywały bezwzględne wymaganie dla egzogennej IL-2 dla drugorzędowych proliferacja (Figura 4f, Figura 4h, czwarty zestaw kolumn). Ten brak proliferacji w odpowiedzi na wtórne sprzężenie TCR był podobnie związany z podwyższonymi poziomami p27kip1 (Figura 4i, drugi panel, prawy pas). Jednakże, tak jak w przypadku proliferacji, zdolność tych komórek do obniżenia poziomu p27kip1 przywrócono przez dodanie IL-2 (Figura 4i, czwarty panel). Ten fenotyp kontrastuje z komórkami T CD4 +, które proliferują w warunkach, w których przekazywanie sygnału przez CTLA-4 nie jest zablokowane, w którym to przypadku sama restytucja TCR, w nieobecności dodatkowej IL-2, jest wystarczająca do obniżenia poziomu p27kip1 i indukowania odpowiedzi proliferacyjnej ( Figura 4i, drugi panel, lewy pas, Figura 2d). To wymaganie dla IL-2 przez limfocyty T z hodowli potraktowanych anty-CTLA-4 może odzwierciedlać zróżnicowaną zdolność tych komórek do wytwarzania IL-2 po ponownej stymulacji w porównaniu z komórkami T z hodowli kontrolnych lub może odzwierciedlać inny próg odpowiedzi na IL. -2 stężenia. Chociaż nieoczekiwane w kontekście wielu badań wskazujących na negatywną rolę CTLA-4 w rozwoju efektorowych komórek T (6), wyniki te są zgodne z innymi badaniami, które pokazują, że w pewnych okolicznościach CTLA-4 może wywierać sieć pozytywny wpływ na pierwotne (31) lub wtórne (32) odpowiedzi komórek T. Należy zauważyć, że nie trzeba inwokować modelu obejmującego transdukcję pozytywnego sygnału kostymulacyjnego przez CTLA-4 w celu wyjaśnienia naszych wyników w tym systemie. Nasze odkrycia są zgodne ze scenariuszem, w którym negatywne sygnały za pośrednictwem CTLA-4 normalnie przeciwstawiają się silnym sygnałom za pośrednictwem TCR transdukowanym przez wysokie dawki agonistycznego anty-CD3, odpuszczając co byłoby w przeciwnym razie nadoptymalną odpowiedzią, w której aktywacja za pośrednictwem IL-2. indukowana śmierć komórki (AICD) (33, 34) lub desensytyzacja receptora (35) może hamować późniejszą mitogenezę. Zgodnie z tym założeniem, limfocyty T CD4 + wprowadzone do naszego badania z anty-CD3 w nieobecności interakcji B7a-CTLA-4 uległy znacznie większej śmierci komórkowej po kolejnym sieciowaniu TCR w porównaniu z komórkami, które otrzymały fizjologiczne podwiązanie CTLA-4 podczas pierwotnego bodźca ( nasze niepublikowane obserwacje). Zmniejszenie awidności podwiązania TCR podczas pierwotnej stymulacji przy braku sygnałów CTLA-4 znacznie poprawiło śmiertelność komórek obserwowaną podczas ponownej stymulacji (nasze niepublikowane obserwacje). Alternatywnie, hamowanie sygnałów CTLA-4 podczas wysokodawkowej stymulacji anty-CD3 może sprzyjać ekspansji komórek T z małą wrażliwością na sieciowanie TCR, co ostatnio wykazano w ludzkim modelu komórek T in vitro, co powoduje populację po słaba wrażliwość na ponowne podwiązanie TCR (32). Te dwa scenariusze nie wykluczają się nawzajem iw każdym przypadku hamowanie ujemnych sygnałów CTLA-4 podczas stymulacji mitogennej in vitro doprowadziłoby do rozwoju populacji limfocytów T o zmniejszonej zdolności do proliferacji po restymulacji TCR. Dyskusja Dane opisane powyżej pokazują, że dwie funkcjonalnie odrębne formy anergii można rozdzielić w pierwotnych komórkach T CD4 + in vitro (Tabela 1)
[przypisy: polskie towarzystwo medycyny estetycznej, polipektomia endoskopowa, tomografia komputerowa gdynia ]
[przypisy: przetrząsarko zgrabiarka, rozdrabniacz uniwersalny, ursus koszalin ]