Profilowanie lipidów identyfikuje sygnaturę triacyloglicerolową oporności na insulinę i poprawia przewidywanie cukrzycy u ludzi ad 8

Informacje na temat spożycia pokarmu były systematycznie uzyskiwane ze szczegółowego, zatwierdzonego kwestionariusza dotyczącego częstotliwości żywności (29). Podczas tej i kolejnych wizyt czterodniowych uczestnicy przeszli badanie lekarskie z udziałem lekarza oraz historię medyczną i rutynowe badania laboratoryjne. Podczas każdej wizyty ustalono obecność cukrzycy i określono stężenie glukozy na czczo powyżej 126 mg / dl lub stosowanie leków obniżających stężenie glukozy, w tym insuliny (30). Ocenę modelu homeostazy zastosowano jako miarę względnej oporności na insulinę, jak w Matthews i in. (31). Projekt zagnieżdżonej obudowy. Podczas kolejnych 3 badań (do 12 lat) 193 osoby zapadły na nową cukrzycę typu 2 w FHS. Modele regresji logistycznej wykorzystano do wygenerowania oceny skłonności dla tych 193 przypadków, z wykorzystaniem wieku, BMI, glikemii na czczo i nadciśnienia (zdefiniowanego jako ciśnienie krwi. 140/90 mmHg lub zastosowanie terapii hipotensyjnej); osobny model został oszacowany dla każdego kolejnego badania każdej płci. Każdy przypadek był dopasowany do kontroli z najbliższym wynikiem oceny skłonności do egzaminu i płci (w granicach 0,10 w skali od 0,0 do 1,0). Kontrolę dopasowaną pod względem dopasowania zidentyfikowano dla wszystkich z wyjątkiem 4 przypadków, uzyskując ostateczną próbkę badawczą 189 przypadków i 189 kontroli. Badania farmakologiczne. Osoby bez cukrzycy w wieku powyżej 18 lat włączono do trwającego badania, aby zrozumieć genetykę ostrej reakcji na metforminę i glipizyd u ludzi w MGH. Podczas pierwszej wizyty uczestnicy otrzymywali pojedynczą dawkę 5 mg glipicydu podczas postu, zebrano osocze, a poziomy glukozy i insuliny mierzono w czasie 0, 60 minut i 120 minut. Po okresie wypłukiwania wynoszącym 6 dni, pacjenci otrzymywali 500 mg metforminy dwa razy dziennie przez 2 dni w celu zmniejszenia glukoneogenezy w wątrobie, a następnie zostali poddani 75-g OGTT w obecności metforminy. Próbki po metforminie w czasie 0 porównano z osoczem pobranym podczas wizyty podstawowej przed podaniem glipizydu. Od pierwszych 164 uczestników kończących protokół wybrano 20 uczestników, którzy reprezentowali zarówno wysokie, jak i niskie końce zakresu HOMA-IR. Ostre testy wysiłkowe. Zrekrutowaliśmy pacjentów ambulatoryjnych skierowanych do Laboratorium ćwiczeń MGH w celu diagnostycznego testowania bieżni (n = 50). W celu zbadania prawidłowej odpowiedzi metabolicznej na ćwiczenia, wybraliśmy pacjentów, którzy spełniali następujące kryteria włączenia: (a) normalna tolerancja wysiłku zdefiniowana przez szacunkową szczytową wartość VO2 większą niż przewidywane 70%; (b) widoczny maksymalny wysiłek na podstawie odpowiedzi serca większej niż 85% przewidzianej przy braku beta-blokady; i (c) preexercise na czczo przez co najmniej 4 godziny. Kryteria wykluczenia obejmowały przerwanie ćwiczeń przez osobę nadzorującą badanie, odwracalne zaburzenia perfuzji lub elektrokardiograficzne dowody niedokrwienia wywołanego wysiłkiem fizycznym, mechanicznego ograniczenia wysiłku lub frakcji wyrzutowej lewej komory mniejszej niż 50%. U 10 osób z cukrzycą typu 2 rozpoznano cukrzycę typu 2 w elektronicznej dokumentacji medycznej, a także otrzymywano co najmniej lek przeciwcukrzycowy. Protokoły badań zostały zatwierdzone przez Institutional Review Boards BU Medical Center i MGH, a wszyscy uczestnicy wyrazili pisemną świadomą zgodę. Wszystkie osocze zebrano w EDTA. Profilowanie lipidów. Profile lipidowe osocza uzyskano przy użyciu spektrometru potrójnego kwadrupolowego 4000 QTRAP (Applied Biosystems / Sciex) sprzężonego z pompą z serii 1200 (Agilent Technologies) i podajnikiem automatycznym HTS PAL (Leap Technologies). Oprogramowanie MultiQuant (wersja 1.1, Applied Biosystems / Sciex) zostało użyte do automatycznej integracji szczytowej, a szczyty zostały ręcznie sprawdzone pod względem jakości integracji. Octan amonu, kwas octowy i rozpuszczalniki klasy LC / MS zakupiono od Sigma-Aldrich. 10 .l osocza ekstrahowano 190 .l izopropanolu, zawierającego wewnętrzny standard, 1-dodekanoilo-2-tridekanoilo-sn-glicero-3-fosfocholinę (Avanti Polar Lipids). Po odwirowaniu supernatanty wstrzyknięto bezpośrednio, a następnie chromatografię z odwróconymi fazami, stosując kolumnę Prosphere HP C4 150 x 3,0 (Grace); faza ruchoma A wynosiła 95: 5: 0,1 (v / v / v) 10 mM octan amonu / metanol / kwas octowy; faza ruchoma B wynosiła 99,9: 0,1 (v / v) metanol / kwas octowy. Kolumnę eluowano izokratycznie za pomocą 80% fazy ruchomej A przez 2 minuty, a następnie liniowy gradient do 20% fazy ruchomej A przez minutę, liniowy gradient do 0% fazy ruchomej A przez 12 minut, a następnie 10 minut na 0%. Faza ruchoma A. Analizy MS przeprowadzono przy użyciu jonizacji przez elektrorozpylanie i skanów Q1 w trybie jonów dodatnich. Napięcie w dyszy jonów było 5,0 kV, a temperatura źródła wynosiła 400 ° C. Wewnętrzne piki standardowe były monitorowane pod kątem kontroli jakości i stosowane do normalizowania obszarów pików analitu
[patrz też: olej kokosowy organiczny, tomografia komputerowa gdynia, polipektomia endoskopowa ]
[przypisy: ursus 11054, ursus 8014h, przetrząsaczo zgrabiarka ]