Hematopoetyczne komórki macierzyste rozmnażają się do momentu narodzin i wykazują odwracalną wadę wszczepienia w fazie ad 7

Ponadto, chociaż poziomy transkryptów nie różniły się między frakcjami G1 i S / G2 / M dla c-Kit, c-mpl, CD44, A 4int, VCAM1 lub CXCR4, 9-krotny wzrost ekspresji CXCL12 odnotowano w S / G2 / M HSCs. Wcześniejsze prace sugerowały, że zdolność przeszczepionych HSC do osiągnięcia niszy w BM, która może wspierać ich samopoczucie, może zależeć od siły gradientu CXCL12, który napotykają w przestrzeni BM, powodując migrację w kierunku osteoblastów, które wyścielają kość (22). Zgodnie z takim modelem można oczekiwać, że zdolność HSC do ekspresji CXCL12, przy braku zmian w ich ekspresji CXCR4, reguluje ich zdolność do reagowania na inne, bardziej odległe źródła CXCL12. Wzmożona ekspresja CXCL12 podczas progresji HSC przez S / G2 / M, jak wykazano tutaj, może wtedy być wystarczająca do zakłócania odpowiedniej wewnątrzkomórkowej odpowiedzi migracyjnej, powodując szybkie różnicowanie, śmierć lub nieodwracalną sekwestrację tych komórek w miejsce, w którym nie można ich pobudzać do dzielenia. Czasowa blokada CXCR4 na komórkach w BM przez wstrzyknięcie SDF-1G2 może następnie zwiększyć poziom wewnątrzb BM CXCL12 do punktu, który przejściowo odtwarza skuteczny gradient chemoatraktantu dla innych niewrażliwych HSC w S / G2 / M. Read more „Hematopoetyczne komórki macierzyste rozmnażają się do momentu narodzin i wykazują odwracalną wadę wszczepienia w fazie ad 7”

Hematopoetyczne komórki macierzyste rozmnażają się do momentu narodzin i wykazują odwracalną wadę wszczepienia w fazie ad 6

Ekspresję genu w G1 ustalono jako i pokazano krotność zmiany poziomów transkryptu w odpowiedniej frakcji S / G2 / M. Wyniki są średnie. SEM danych z 2. 3 replikatów biologicznych mierzonych trzykrotnie. P <0,05 w stosunku do odpowiednich próbek G1. Read more „Hematopoetyczne komórki macierzyste rozmnażają się do momentu narodzin i wykazują odwracalną wadę wszczepienia w fazie ad 6”

Hematopoetyczne komórki macierzyste rozmnażają się do momentu narodzin i wykazują odwracalną wadę wszczepienia w fazie ad 5

Jednakże mobilizacja prymitywnych komórek krwiotwórczych może być również stymulowana przez blokowanie przekazywania sygnałów CXCL12 / CXCR4, jak osiągnięto przez podawanie AMD3100 in vivo, antagonisty CXCL12 (40). Ponadto ostatnio wykazano, że podawanie AMD3100 in vivo może zwiększać konkurencyjność zdolności wszczepiania przeszczepionych komórek BM w nienapromieniowanych gospodarzach (41). Odkrycia te sugerują, że celowanie w szlak CXCL12 / CXCR4 może również wpływać na zmienne właściwości wszczepiania HSC na rowerze przez wpływ na same HSC lub przeszczepiony gospodarz. Aby zbadać te możliwości, najpierw zapytaliśmy, czy uprzednio poddaje się przeszczepianiu HSC, czy też gospodarzom ze swoistym antagonistą CXCL12 może zmienić poziom repopulacji uzyskany 16 tygodni później. Antagonistą CXCL12 stosowanym w tych doświadczeniach był SDF-1G2 (zwany również P2G, ponieważ jest identyczny z czynnikiem pochodzącym z komórki zrębowej, z tym wyjątkiem, że prolina w pozycji 2 została przekształcona w glicynę, pozycja 42). Read more „Hematopoetyczne komórki macierzyste rozmnażają się do momentu narodzin i wykazują odwracalną wadę wszczepienia w fazie ad 5”

Hematopoetyczne komórki macierzyste rozmnażają się do momentu narodzin i wykazują odwracalną wadę wszczepienia w fazie czesc 4

Aby zbadać tę możliwość, populacja G1 / S / G2 / M Ter119. Komórki FL 14,5-dpc podzielono na frakcje składnika G1 i S / G2 / M, a każdy z tych 2 podzestawów testowano oddzielnie dla CRU. W tym przypadku, ustawienia bramek wybrane do rozdzielenia komórek fazy G1 (2n DNA) i fazy S (> 2n DNA) zostały potwierdzone przez profile uzyskane podczas sortowania komórek wybarwionych jodkiem propidyny (PI) i ponownie przeanalizowane przez FACS (rysunek 4A). Figura 4Hst / posortowane w PyK HSC przedstawiają bezwzględny, lecz przejściowy defekt wszczepienia S / G2 / M. (A) Ter119. Read more „Hematopoetyczne komórki macierzyste rozmnażają się do momentu narodzin i wykazują odwracalną wadę wszczepienia w fazie czesc 4”

Profilowanie lipidów identyfikuje sygnaturę triacyloglicerolową oporności na insulinę i poprawia przewidywanie cukrzycy u ludzi czesc 4

Większość reakcji biochemicznych na spożycie glukozy można przypisać endogennemu wzrostowi insuliny (9). Co ciekawe, w odpowiedzi na OGTT stwierdziliśmy, że TAG o niższej liczbie węgli i zawartości podwójnego wiązania zmniejszyły się, a TAG o względnie wyższej liczbie węgli i zawartości wiązań podwójnych wzrosły (Figura 5A). Spadek TAG o niższej zawartości węgla i zawartości wiązań podwójnych był wyraźniejszy u osób w najniższym kwartylu HOMA-IR w stosunku do osób w najwyższym kwartylu HOMA-IR (Figura 5B). Figura 5 TAG i działanie insuliny w FHS. (A) Średni procent zmian każdego TAG w odpowiedzi na OGTT. Read more „Profilowanie lipidów identyfikuje sygnaturę triacyloglicerolową oporności na insulinę i poprawia przewidywanie cukrzycy u ludzi czesc 4”

Profilowanie lipidów identyfikuje sygnaturę triacyloglicerolową oporności na insulinę i poprawia przewidywanie cukrzycy u ludzi cd

Każdy punkt danych reprezentuje odrębny analit lipidowy, zorganizowany wzdłuż osi x, w oparciu o całkowitą zawartość węgla acylowego (po lewej) lub podwójną (po prawej). Wielkość każdego koła jest proporcjonalna do SD stosunków przypadku / kontroli dla każdego lipidu; dlatego mniejsze kółka oznaczają większą precyzję, podczas gdy większe koła oznaczają mniejszą precyzję. Uwaga: dwa panele wyświetlają te same punkty danych, po prostu rozmieszczone wzdłuż osi x przez inną zmienną. Ryzyko cukrzycy utrzymuje się po dostosowaniu w analizie wielowymiarowej. Biorąc pod uwagę brak równowagi w całkowitych triglicerydach i cholesterolu HDL pomiędzy przypadkami i kontrolami podczas badania podstawowego (Tabela 1), przetestowaliśmy, czy związek między ryzykiem cukrzycy a liczbą węgli lipidowych i zawartością podwójnego wiązania utrzymywał się po wielozmiennej korekcie. Read more „Profilowanie lipidów identyfikuje sygnaturę triacyloglicerolową oporności na insulinę i poprawia przewidywanie cukrzycy u ludzi cd”

Profilowanie lipidów identyfikuje sygnaturę triacyloglicerolową oporności na insulinę i poprawia przewidywanie cukrzycy u ludzi ad

Kohorta Potomstwa FHS jest podłużną, opartą na społeczności kohortach zapoczątkowaną w 1971 r. (8). Pomiędzy 1991 r. A 1995 r. Oznaczono jako linię bazową . Read more „Profilowanie lipidów identyfikuje sygnaturę triacyloglicerolową oporności na insulinę i poprawia przewidywanie cukrzycy u ludzi ad”

Profilowanie lipidów identyfikuje sygnaturę triacyloglicerolową oporności na insulinę i poprawia przewidywanie cukrzycy u ludzi

Dyslipidemia jest niezależnym czynnikiem ryzyka dla cukrzycy typu 2, chociaż dokładnie, który z wielu lipidów w osoczu przyczynia się do tego, pozostaje niejasny. W związku z tym zbadaliśmy, czy profilowanie lipidów może informować o przewidywaniu cukrzycy, przeprowadzając profilowanie lipidów metodą chromatografii cieczowej / spektrometrii masowej u 189 osób, u których wystąpiła cukrzyca typu 2 i 189 osób bez choroby, z ponad 12-letnią obserwacją w badaniu Framingham Heart Study. Stwierdziliśmy, że lipidy o niższej zawartości węgla i zawartości wiązań podwójnych wiązały się ze zwiększonym ryzykiem cukrzycy, podczas gdy lipidy o wyższej zawartości węgla i zawartości wiązań podwójnych wiązały się ze zmniejszonym ryzykiem. Ten wzór był najsilniejszy dla triacylogliceroli (TAG) i utrzymywał się po wielozmiennej korekcie dla wieku, płci, BMI, glukozy na czczo, insuliny na czczo, całkowitej zawartości trójglicerydów i cholesterolu HDL. Kombinacja 2 TAGs dalej poprawiła przewidywanie cukrzycy. Read more „Profilowanie lipidów identyfikuje sygnaturę triacyloglicerolową oporności na insulinę i poprawia przewidywanie cukrzycy u ludzi”

Hematopoetyczne komórki macierzyste rozmnażają się do momentu narodzin i wykazują odwracalną wadę wszczepienia w fazie ad 9

Kontrole wstrzyknięto PBS zamiast SDF-1G2. Real-time PCR. Komórki zostały posortowane na ml HF / 10, a RNA wyizolowano przy użyciu zestawu izolującego RNA PicoPure (Arcturus) zgodnie z zaleceniami dostawcy, w tym 15-minutowego traktowania DNAse1 (Qiagen) na kolumnie w temperaturze pokojowej. RNA eluowano do objętości 11- (ll i przechowywano w temperaturze <80 ° C. Następnie wytworzono preparat cDNA przy użyciu systemu SuperScript III do syntezy pierwszej nici do RT-PCR (18080093; Invitrogen) zgodnie z zaleceniami producenta, z reakcją przeskalowaną w celu zastosowania 25 ul. Read more „Hematopoetyczne komórki macierzyste rozmnażają się do momentu narodzin i wykazują odwracalną wadę wszczepienia w fazie ad 9”

Profilowanie lipidów identyfikuje sygnaturę triacyloglicerolową oporności na insulinę i poprawia przewidywanie cukrzycy u ludzi ad 9

Ponadto wykonaliśmy profilowanie lipidów na próbkach plazmy połączonej, rozmieszczonych co 30 próbek eksperymentalnych w ogólnej kolejce próbek, umożliwiając wykrycie dryfu czasowego w działaniu instrumentu. Każde z tych wstrzyknięć do spektrometru masowego było generowane z odrębnej 10-. L porcji pulowanej plazmy, ekstrahowanej i przetwarzanej indywidualnie. CV dla każdego analitu lipidowego w sumie 29 połączonych próbek osocza pokazano na Dodatkowej figurze 3. Czterdzieści sześć procent analitów miało CV mniejsze lub równe 10%, a 85% analitów miało CV mniejsze niż lub równe 20%. Read more „Profilowanie lipidów identyfikuje sygnaturę triacyloglicerolową oporności na insulinę i poprawia przewidywanie cukrzycy u ludzi ad 9”