Dysfunkcja cholinergiczna w mysim modelu choroby Alzheimera jest odwracana przez anty-A przeciwciało ad 7

Konieczne będą dalsze badania w celu pełnego określenia dokładnej interakcji pomiędzy ChT-1 i A (3; jednak nasze wyniki to A. bezpośrednio związana z ChT-1, potencjalnie hamując biosyntezę ACh, wzmacniając hipotezę selektywnej autokominacji błony cholinergicznej. pod ciągłym popytem ACh, co może wyjaśniać zwiększoną wrażliwość neuronów cholinergicznych w mózgu AD (36). Dodatkowo nasze dane nie eliminują możliwości, że niektóre gatunki A. (zwłaszcza A (40) może ulec fizjologicznie istotnej roli, podczas gdy inne gatunki (zwłaszcza A (42) mogą wywierać bardziej patologiczną rolę w neurotransmisji cholinergicznej. Co ciekawe, ostatnie doniesienia wykazały, że a-synukleina, inne białko mózgu podatne na agregację w chorobie Parkinsona, wchodzi w interakcję z transporterem dopaminy, co sugeruje, że nieprawidłowe agregowanie białek ogólnie może zakłócać przekaźnictwo nerwowe przez zakłócanie normalnej funkcji transportera (37). Wreszcie jest również możliwe, że zwiększenie i / lub obniżenie poziomu receptorów muskarynowych przed i po-synaptycznych może wpływać, zależnie od A (3, na wypływ ACh z hipokampa. Chociaż cholinergiczny układ neuroprzekaźników nie jest ani jedynym, ani pierwszym układem neuroprzekaźników dotkniętym AD, powszechnie uważa się, że deaferentacja cholinergiczna w mózgu AD przyczynia się do zmniejszenia pamięci związanej z postępem choroby. Konieczne będą dalsze prace w celu znalezienia dokładnego mechanizmu (mechanizmów), w którym A. wpływa na neurotransmisję cholinergiczną i neurodegenerację; jednak nasze dane wyraźnie wykazują bezpośrednie działanie cholinotoksyczne A. peptyd (y) na uwalnianie hipokampa ACh u myszy PDAPP, które szybko uległo odwróceniu przez traktowanie anty-A. przeciwciało m266. Podsumowując, nasze odkrycia sugerują, że pośredniczone przez A. Zakłócenie neurotransmisji cholinergicznej i pamięci może nastąpić przy braku jawnej neurodegeneracji i że podawanie pewnych przeciwciał anty-A. przeciwciała mogą odwracać zaburzenia wczesnej pamięci, szczególnie u pacjentów z łagodnym upośledzeniem funkcji poznawczych lub wczesnym AD. Metody Transgeniczne myszy. Transgeniczne myszy PDAPP stosowane w tym badaniu były homozygotycznymi myszami pochodzącymi z heterogennego tła obejmującego szczepy C57BL / 6J, DBA / 2J i Swiss-Webster (14). Młode (4. 6 miesięcy) samice myszy PDAPP, jak również dobrane pod względem wieku i dobrane pod względem tła kontrolne WT zastosowano do wszystkich badań mikrodializy in vivo. W celu określenia aktywności w otwartym polu w nowym środowisku oceniano młodych samców PDAPP (w wieku 4. 6 miesięcy), jak również kontrolnych WT w odniesieniu do tła, wieku i płci. Wszystkie eksperymenty wykorzystujące zwierzęta zostały poddane przeglądowi i zatwierdzone przez Wewnętrzny Komitet ds. Pielęgnacji i Użytkowania Zwierząt w Lilly Research Laboratories. Mikrodializa in vivo. Myszy poddano głębokiemu znieczuleniu za pomocą mieszaniny wodzianu chloralu i pentobarbitalu, a sondę do dializy CMA / 7 (2 mm) (mikrodializa CMA) wszczepiono jednostronnie do hipokampa (AP, 8,3; ML, +3,1, DV, 5 4,2). . Myszom pozwolono odzyskać przytomność w ich klatkach domowych przez ponad 24 godziny, a rano eksperymenty przeniesiono do cylindra z pleksiglasu (15 cm x 25 cm) z czystym podłożem. Sondę do dializy podłączono do mikrodializowanego aparatu z obrotową cieczą (TCS-2; SciPro Inc.). Perfusat był dostarczany z szybkością 1,5 l / min, a próbki analizowano w linii z HPLC sprzężoną z układem wykrywania elektrochemicznego (EC), jak opisano wcześniej (18). Perfusat był zmodyfikowanym sztucznym roztworem Ringera uzupełnionym 0,33. M neostygminy, aby zapobiec enzymatycznej degradacji. Myszy pozostawiono do zaaklimatyzowania do tego ustawienia przez 4 godziny, podczas których próbki dializatu zbierano co 15 minut. Niewielka zmienność (<10%) wystąpiła w sygnale ACh w tym okresie, a wyjściowe poziomy wypływu ACh ustalono jako średnią z 5 15-minutowych próbek przed jakąkolwiek późniejszą manipulacją. Kiedy myszy zostały wystawione na nowe środowisko, zostały one przeniesione do nowej klatki, która była w przybliżeniu tej samej wielkości, ale wyraźnie różniła się kolorem (ciemnoczerwony od klarownego) i teksturą (gruby kauczuk bez ściółki w porównaniu z pleksiglasem z pokrytą posadzką podłogą). Myszy pozostawały w tym nowym środowisku przez godzinę, podczas których próbki dializatów zbierano i analizowano, jak opisano powyżej. Po godzinie myszy przeniesiono z powrotem do ich oryginalnej klatki testowej (cylinder z pleksiglasu) i próbki zebrano przez dodatkową godzinę, podczas których poziomy ACh powróciły do linii podstawowej. Do manipulacji farmakologicznej myszom wstrzyknięto skopolaminę (0,3 mg / kg ip), a próbki zebrano przez dodatkowe 3 godziny [hasła pokrewne: rehabilitacja po złamaniu szyjki kości udowej, pizza hawajska składniki, okulistyka ceglana katowice ] [patrz też: przetrząsaczo zgrabiarka, przetrząsarko zgrabiarka, rozdrabniacz uniwersalny ]