Dysfunkcja cholinergiczna w mysim modelu choroby Alzheimera jest odwracana przez anty-A przeciwciało ad 5

Określiliśmy również wychwyt choliny o wysokim powinowactwie w synaptosomach hipokampa przygotowanej z myszy PDAPP, które traktowano m266 przed przygotowaniem surowej frakcji synaptosomu (22). Gdy myszy PDAPP podano m266 24 godziny przed pomiarem wychwytu choliny, wartości Vmax nie różniły się istotnie pomiędzy myszami kontrolnymi PDAPP i WT (Tabela 1). Figura 5 Uwolnienie AChHP jest niezmienione po leczeniu innymi IgG. (A) Hipokampa uwalnianie ACh u myszy transgenicznych WT i PDAPP po ekspozycji na nowe środowisko i 24 godziny po podaniu nieistotnego IgG (PDAPP + IgG; 500 .g ip) lub anty-A (3). przeciwciało 3D6 (PDAPP + 3D6; 500. g ip). (B) Uwolnienie ACh z hipokampa myszy PDAPP i WT po podaniu skopolaminy (0,3 mg / kg ip) 24 godziny po podaniu nieistotnego IgG lub anty-A. przeciwciało 3D6. Nie zaobserwowano znaczącej różnicy pomiędzy leczonymi PDAPP i nieleczonymi myszami PDAPP w A lub B (C) Podstawowe poziomy uwalniania hipokampa ACh z myszy WT i PDAPP 24 godziny po podaniu nieistotnego IgG lub anty-A (3. przeciwciało 3D6. * P <0,05 w porównaniu z WT i PDAPP + 3D6. n = 3. 10 myszy na grupę, 4. 6 miesięcy. Nauka przyswajania na myszach PDAPP jest przywracana po leczeniu m266. Ponieważ przyzwyczajenie aktywności lokomotorycznej do nowego środowiska zapewnia miarę procesów uczenia się związanych z tworzeniem się pamięci pierwotnej i ponieważ wiadomo, że poziomy ACh zwiększają się, gdy gryzonie są umieszczane w nowym środowisku, zmierzyliśmy przyzwyczajenie do nowego środowiska po tym, jak myszy PDAPP potraktowano m266 (18, 24). Jak przewidywano, młode (pre-płytkowe) myszy PDAPP, które wykazują nadczynność cholinergiczną nad nowością, nie przyzwyczajają się do nowego środowiska (dane nie pokazane). Po potraktowaniu m266, myszy PDAPP przyzwyczaiły się do swojego nowego środowiska w sposób podobny do ich odpowiedników WT (Figura 6). Przeciwnie, gdy myszy PDAPP traktowano 3D6, one, podobnie jak nietraktowane myszy PDAPP, nie przyzwyczajały się do nowego środowiska (Figura 6). Figura 6 Nauka na wychowaniu w nowatorskim otwartym polu u myszy PDAPP jest znormalizowana po traktowaniu m266. (A) transgeniczne myszy PDAPP wykazywały zwiększoną aktywność lokomotoryczną, która uległa zmniejszeniu po leczeniu anty-A. przeciwciało m266 (500 .g ip), ale nie po leczeniu anty-A. przeciwciało 3D6 (500 .g ip). (B) Łączna aktywność lokomotoryczna na sesję 60-minutową. *** P <0,001. n = 20 myszy na grupę, 4. 6 miesięcy. Omówienie Ostatnio doniesiono, że A (312 i nikotynowy receptor 7A AH (A7) tworzą in vitro stabilny kompleks o wysokim powinowactwie, jak również kolokalizują na płytkach neurytycznych w mózgu AD, co sugeruje, że A (31. może wpływać na normalną neurotransmisję cholinergiczną przez bezpośrednie modulowanie. 7 (25). Według naszej wiedzy jednak nasza jest pierwszą demonstracją, że A. Peptydy (peptydy) bezpośrednio wiążą się z ChT-1 i zaburzają jego funkcję fizjologiczną, tym samym zaburzając przekaźnictwo neurologiczne cholinergiczne in vivo. Używając dobrze scharakteryzowanego transgenicznego mysiego modelu AD. mysz PDAPP. w połączeniu z mikrodializą in vivo, określiliśmy ilościowo uwalnianie ACh z hipokampu obudzonego i swobodnie poruszających się zwierząt i obserwowaliśmy znaczące zmniejszenie uwalniania ACh u myszy PDAPP w warunkach podstawowych i wyraźną dysregulację neurotransmisji cholinergicznej w odpowiedzi na bodzce farmakologiczne lub fizjologiczne, które ocenić i są związane z normalną funkcją poznawczą. Zmniejszone uwalnianie hipokampa i podstawowe poziomy ACh w tkankach nie wynikały ze zmniejszonego poziomu mRNA ChT-1 lub pozakomórkowych poziomów choliny-prekursora ACh. W przeciwieństwie do tego, zaobserwowano znaczny wzrost szybkości wychwytu choliny o wysokim powinowactwie, gdy synaptosomy zostały przygotowane z myszy PDAPP, co najprawdopodobniej stanowi kompensacyjną zmianę w odpowiedzi na niedobór synapsy cholinergicznej. Ponadto określiliśmy przez eksperymenty koimmunoprecypitacji, że A. może bezpośrednio kojarzyć się z ChT-1 i tym samym zakłócać jego wewnątrzkomórkowy obrót, lokalizację i normalne funkcje fizjologiczne. Podawanie anty-A. przeciwciała m266 myszom PDAPP przywracały uwalnianie hipokampa ACh do poziomów bliskich WT, gdy zmierzono je w warunkach podstawowych lub po ekspozycji na nowe środowisko. Bardziej dramatyczne było jednak prawie całkowite przywrócenie hipokampowego uwalniania ACh, gdy myszy PDAPP podano m266 przed podaniem skopolaminy. Dodatkowo, szybkość wychwytu choliny do synaptosomów hipokampa przygotowanego z myszy PDAPP po podaniu m266 została prawie całkowicie przywrócona do obserwowanej u myszy WT [hasła pokrewne: nafta kosmetyczna z olejkiem rycynowym, szpital na szaserów warszawa, przetrząsarko zgrabiarka ] [przypisy: czy pasujemy do siebie test, okulistyka ceglana katowice, prawo wykonywania zawodu lekarza ]