Dryf antygenowy jako mechanizm unikania guza niszczenia przez limfocyty T cytolityczne ad 8

Ponieważ mutacja w obu allelach w większości klonów jest mało prawdopodobna, uważamy, że komórki nowotworowe J558-Neo mają prawdopodobnie tylko jedną kopię genu P1A. Ponieważ P1A został niedawno zmapowany do chromosomu X (25), hemizygotyczność genu może być spowodowana faktem, że komórki nowotworowe pochodzą od samców myszy (chociaż nasza analiza PCR dla markera chromosomu Y wskazała, że komórki J558-Neo brak chromosomu Y, dane niepokazane) lub utrata heterozygotyczności pięciu klonów podczas nowotworzenia. Pozorna heterozygotyczność może być spowodowana przypadkowym wysiewem dwóch niezależnych klonów do jednej studzienki. Powiązanym problemem jest to, czy komórki J558-Neo stosowane w bieżącym badaniu składają się z mieszaniny komórek o wysokiej częstotliwości mutacji w antygenowych epitopach P1A. Uważamy, że jest to mało prawdopodobne z trzech powodów. Po pierwsze, nasza analiza 37 klonów z komórek macierzystych za pomocą mapowania enzymów restrykcyjnych i sekwencjonowania nie ujawniła mutacji w epitopie antygenowym. Po drugie, nasze wielokrotne wysiłki zmierzające do selekcji mutantów P1A aktywowanymi specyficznymi dla P1A CTL i rodzicielskimi komórkami nowotworowymi w dziesięciu 96-studzienkowych płytkach (5 x 104 komórek nowotworowych / dołek) nie dały żadnych in vitro przeciwciał odpornych na CTL (dane nie pokazane). ). Może to spowodować, że częstotliwość mutantów będzie mniejsza niż jedna na 5 × 107 komórek. Wyniki te sugerują, że komórki z mutacjami w epitopie P1A nie są obecne na wysokich częstotliwościach przed selekcją komórek T. Ponieważ rozpoczęliśmy terapię limfocytów T dopiero po osiągnięciu guzów o średnicy większej niż 1,2 cm, szacujemy, że w momencie leczenia może dochodzić do 109 komórek guza na mysz. W rezultacie może istnieć znaczna liczba wariantów nowotworów do selekcji in vivo. Po trzecie, komórki nowotworowe izolowane z RAG-2 | 3 / | myszy, które nie otrzymały żadnej terapii komórkami T nie ujawniły mutacji w antygenowym epitopie P1A (dane nie pokazane). Podobnie, komórki nowotworowe odzyskane od myszy, które otrzymały nietransgeniczne komórki T, również nie zawierały żadnych mutacji w epitopie P1A. Dlatego opisane tutaj mutanty muszą wynikać z selekcji immunologicznej. Nasza praca wykazała, że oprócz utraty antygenu (brak ekspresji genów kodujących antygen nowotworowy) (12, 26) i utraty MHC (10, 11), antygenowość nowotworów może zostać zmieniona przez dryft antygenowy. Zatem, podobnie jak wirusy, komórki nowotworowe mogą uniknąć zniszczenia za pośrednictwem limfocytów T za pośrednictwem mutacji w ich antygenowych epitopach. Chociaż nie jesteśmy świadomi bezpośrednich dowodów, dwie linie poprzednich prac są zgodne z poglądem, że mutacje w antygenowych epitopach nowotworowych mogą być mechanizmem do uchylania się przez komórki nowotworowe. Po pierwsze, klony CTL były od dawna używane jako narzędzia do izolowania mutantów antygenowych nowotworów in vitro, chociaż do tego celu zazwyczaj potrzebna jest długa i powtarzana selekcja in vitro (17, 27, 28). Po drugie, z wariantów utraty antygenów opisanych w klasycznym badaniu (12), udowodniono później, że zawiera on mutację w epitopie P1A (pozycja 7, V. A) (17). Ta mutacja zapobiegła rozpoznawaniu klonu przez jeden, ale nie inny klon CTL specyficzny dla tego samego epitopu (17). Jednak autorzy donieśli, że klon nowotworowy niosący tę mutację miał znaczącą przewagę wzrostu in vitro w stosunku do innych komórek nowotworowych w tym samym izolacie (12). Nie jest zatem jasne, czy ten wariant nowotworu został wybrany dla in vivo, a jeśli tak, czy został wybrany na podstawie jego braku antygenowości. Jeśli na oba te pytania odpowiedziano twierdząco, wskazywałoby to, że dryf antygenowy w nowotworach może wystąpić u myszy z niezachodowanym repertuarem komórek T. Ponieważ większość naszych danych obejmuje adoptywne przeniesienie oczyszczonych transgenicznych komórek T do myszy z niedoborem odporności, interesujące jest rozważenie, czy dryf antygenowy może wystąpić u normalnego gospodarza z nowotworem, w którym odpowiedź immunologiczna składa się z komórek T CD4, CD8 Komórki T i komórki B. Skoro zweryfikowaliśmy nasz wniosek z adoptywnie przeniesionymi komórkami śledziony całkowitej z TCR. transgeniczne myszy łańcucha, które mają wszystkie podzbiory limfocytów, uważamy, że dryf antygenowy może zachodzić w gospodarzu z wieloma podzbiorami limfocytów. Co więcej, ostatnie badania wskazują, że homeostatyczna proliferacja limfocytów T, po adoptywnym przeniesieniu do gospodarza z niedoborem odporności, może zwiększyć skuteczność immunoterapii zarówno u zwierząt doświadczalnych (29), jak i u ludzi (30). Takie ustawienie jest zasadniczo identyczne z podejściem w obecnym badaniu. Kilka właściwości wariantów antygenowych P1A zasługuje na komentarz. Po pierwsze, chociaż istnieje ogólna korelacja pomiędzy wiązaniem kompleksu H-2Ld: peptyd z TCR i zdolnością peptydów do indukowania odpowiedzi limfocytów T, różnica w wiązaniu jest znacznie mniejsza niż w funkcji biologicznej.
[podobne: wrzodziejące zapalenie jelita grubego objawy, polskie towarzystwo medycyny estetycznej, rehabilitacja po złamaniu szyjki kości udowej ]
[więcej w: czy pasujemy do siebie test, okulistyka ceglana katowice, prawo wykonywania zawodu lekarza ]